【摘 要】
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目的 观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠软脑膜间皮细胞(RLMCs)结缔组织生长因子( CTCF)表达的影响.方法 体外培养RLMCs,并将其分为4组:(1)0组(正常对照组):用无血清培养
【机 构】
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新乡医学院第一附属医院神经内科,河南卫辉,453100
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目的 观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠软脑膜间皮细胞(RLMCs)结缔组织生长因子( CTCF)表达的影响.方法 体外培养RLMCs,并将其分为4组:(1)0组(正常对照组):用无血清培养基(FSM)培养细胞;(2)1组:用含TGF-β11 ng/ml培养细胞;(3)2组:用含TGF-β1 2 ng/ml培养细胞;(4)3组:用含TGF-β14 ng/ml培养细胞;各组分别在TCF-β1刺激6、12及24 b后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定CTCF mRNA水平;蛋白免疫印迹(Westem blot)测定CTCF蛋白表达.数据以平均值±标准差(-χ±s)表示,各个浓度点组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),两两比较采用最小显著法(LSD)检验,以P<0.05有统计学意义.结果 在6、12及24 h分别以TCF-β1 1ng/mL、2 ng/mL、4 ng/mL处理,CTGF mRNA表达水平与对照组比较,差异有显著性(F6h=46.549、F12h= 287.098、F24h=109.202,P均<0.001),呈剂量依赖性,以TGF-β1处理12 h组CTGF mRNA表达差异明显.western blotting:正常对照组RLMCs细胞和不同浓度的TGF-β1刺激后均表达CTGF蛋白,在TGF-β1刺激6、12及24 h后,各组均随着浓度的增加而增加,差异有显著性(F6h= 52.988、F12h= 95.331、F24h=157.107,P均<0.001),呈剂量依赖性,以TGF-β1处理6h组CTGF蛋白表达差异明显.结论 TGF-β1能诱导RLMCs中CTGF通路激活.TGF-β1刺激RLMCs中CTGF mRNA和蛋白的表达,而且随浓度增加而显著.CTGF可能作为神经系统疾病中抑制脑膜纤维化的靶点而进一步研究.
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