【摘 要】
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采用PCR扩增法得到小鼠TAp633,野生型及两种缺失突变体的cDNA,3种cDNA与表达载体pGEX-2TK重组构建成GST融合表达质粒并转化感受态E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导了小鼠TAp63γ野生型
【机 构】
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四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,四川大学纳米生物医学技术与膜生物学研究所,SchoolofMedicine
【基金项目】
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教育部新世纪人才资助计划(NCET-04-0861)
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采用PCR扩增法得到小鼠TAp633,野生型及两种缺失突变体的cDNA,3种cDNA与表达载体pGEX-2TK重组构建成GST融合表达质粒并转化感受态E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导了小鼠TAp63γ野生型及两种缺失突变体的可溶性表达。诱导表达的菌液经离心收集菌体、超声破碎及Triton X-100增溶后获得可溶性表达蛋白粗提液。利用Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲合层析纯化出电泳均一的3种GST融合蛋白。凝胶滞留分析证实仅野生型小鼠TAp631蛋白能特异
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