【摘 要】
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微型腺病毒(mAd)是去除所有编码基因,仅保留两侧反向末端重复序列(ITR)及包装信号(Ψ)的新型腺病毒载体. 它具有包装容量大,免疫原性小等优点.在大量扩增时,需与缺失E1区及包
【机 构】
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复旦大学生命科学学院遗传学研究所,复旦大学生命科学学院遗传学研究所,第二军医大学基础部细胞生物学教研室
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金，教育部优秀青年教师资助计划，高等学校博士学科点专项科研项目，教育部霍英东教育基金，全国高等学校优秀博士学位论文作者专项基金，教育部跨世纪优秀人才培养计划
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微型腺病毒(mAd)是去除所有编码基因,仅保留两侧反向末端重复序列(ITR)及包装信号(Ψ)的新型腺病毒载体. 它具有包装容量大,免疫原性小等优点.在大量扩增时,需与缺失E1区及包装信号的辅助腺病毒共转染入包装细胞(293细胞)内,CsCl超离心纯化,将二者分开.再通过琼脂糖覆盖挑斑、在包装细胞内大量扩增、CsCl超离心纯化等步骤,最终得到较为纯净的mAd. 但因mAd 结构不稳定,易与辅助病毒发生同源重组,在CsCl超离心时不能完全与辅助病毒分开,导致外源基因表达逐步下降.
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