蛋白磷酸酶LY1基因原核表达载体的构建及蛋白的初步表达

来源 :疾病控制杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zy15400444

【摘要】

：

目的构建蛋白磷酸酶LY1基因的原核表达载体,并在E.coliBL21（DE3）中表达。方法PCR扩增LY1的CDs基因片段,并将其克隆入原核表达载体pET28a（＋）中构建重组质粒pET28a（＋）-LY1。经限制性内

【作者】

：

彭万仁陈兵倪芳鲁云霞郑红李菲菲汪思应

【机构】

：

安徽医科大学第一附属医院肿瘤内科,安徽医科大学基础医学院生化教研室,安徽医科大学基础医学院病理生理教研室

【出处】

：

疾病控制杂志

【发表日期】

：

2007年5期

【关键词】

：

基因蛋白基因表达 Gene Protein Gene expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30572206）,安徽省自然科学基金（00044202,N001043709）,安徽省教育厅自然科学基金（2005kj333zc）,安徽省人才开发基金（20022035）

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目的构建蛋白磷酸酶LY1基因的原核表达载体,并在E.coliBL21（DE3）中表达。方法PCR扩增LY1的CDs基因片段,并将其克隆入原核表达载体pET28a（＋）中构建重组质粒pET28a（＋）-LY1。经限制性内切酶Nhe I、XhoⅠ双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coliBL21（DE3）,经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白。SDS-PAGE、Western blot方法检测重组蛋白的表达。结果获得全长为1179bp的LY1基因片段,以构建的重组质粒pET28a（＋）-LY1转化E.coliBL2

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