高脂对大鼠肝星状细胞纤维化的影响

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guochang704
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目的

研究高脂对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响,探讨高脂对肝纤维化影响的机制。

方法

体外培养HSC-T6,300μmol/L棕榈酸(PA)处理HSC-T6 24h,对照组采用等量牛血清白蛋白(BSA)处理HSC-T6 24 h,Western blot检测α-SMA、MMP-2的表达;剂量效应组分别用浓度为0 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L、300 μmol/L、500 μmol/L、1 000 μmol/L的PA处理HSC-T6 24 h;时间效应组用浓度为300 μmol/L的PA分别处理HSC-T6 0 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h,对照组采用等量BSA代替PA,Western blot检测HMGB1、α-SMA、MMP-2的表达;浓度为0 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml、200 ng/ml、500 ng/ml的重组人HMGB1(rHMGB1)处理HSC-T6 48h,对照组采用等量磷酸盐缓冲液代替PA,Western blot检测α-SMA、MMP-2的表达;PA组采用浓度为300 μmol/L的PA处理HSC-T6 24 h,PA+HMGB1-siRNA组在下调HSC-T6细胞内HMGB1后加入300 μmol/L的PA处理24 h,空白对照组采用等量BSA代替PA,Western blot检测HMGB1、α-SMA、MMP-2的表达。计量资料采用单因素方差分析,两两比较采用t检验。

结果

(1)300 μmol/L PA处理HSC-T6 24 h,α-SMA、MMP-2的表达较0h明显增加(P < 0.05);(2)不同浓度PA处理HSC-T6 24 h,HMGB1、MMP-2的表达较未处理组(0 μmol/L)明显增加(P < 0.01),α-SMA的表达在PA浓度为200 μmol/L、300 μmol/L、500 μmol/L、1 000 μmol/L时出现明显增加(P < 0.01);300 μmol/L PA处理不同时间,HMGB1、α-SMA和MMP-2呈现不同程度的上升,并且在16 h、24 h、48 h较0 h出现显著性增加(P < 0.01);(3)100 ng/ml、200 ng/ml、500 ng/ml rHMGB1处理HSC-T6 48 h,α-SMA、MMP-2的表达较未处理组(0 ng/ml)明显增加(P < 0.05);(4)与PA组相比,PA+HMGB1-siRNA处理HSC-T6 24 h,HMGB1、α-SMA和MMP-2的表达明显下降(P < 0.05)。

结论

高脂可以通过上调HSC-T6中HMGB1的表达来促进α-SMA、MMP-2的表达,从而导致肝纤维化的发生。

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