人高迁移率族蛋白1基因的克隆和表达

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：falconcarmack

【摘要】

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目的:克隆人高迁移率族蛋白1(HMG-1)编码基因,构建重组表达载体并对其诱导表达. 方法: 通过RT-PCR方法扩增出人外周血单个核细胞中HMG-1的编码基因,克隆于载体pGEM-T easy,测

【作者】

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别良峰于文彬程晓东苏明权刘家云

【机构】

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第四军医大学西京医院临床分子生物学研究中心

【出处】

：

第四军医大学学报

【发表日期】

：

2003年3期

【关键词】

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人高迁移率族蛋白1 基因克隆基因表达编码基因 RT-PCR法 high mobility group1 protein cloning prokaryoti

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目的:克隆人高迁移率族蛋白1(HMG-1)编码基因,构建重组表达载体并对其诱导表达. 方法: 通过RT-PCR方法扩增出人外周血单个核细胞中HMG-1的编码基因,克隆于载体pGEM-T easy,测序分析后亚克隆于表达载体pGEX-4T-2,测序证实序列正确后转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导4 h后可表达Mr约56 000的融合蛋白GST-HMG1. 结果: 克隆了人HMG-1的编码基因,构建了融合蛋白的重组表达质粒pGEX-HMG1,表达的融合蛋白产物经凝胶薄层扫描检测,占全菌总蛋白的0.23. 结

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