【摘 要】
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通过敲除妥布霉素生物合成基因tobS1-C,定向选育阿泊拉霉素高产菌株。PCR扩增tobS1-C基因上下游同源序列和红霉素抗性基因ermE,构建穿梭载体pSH6,利用接合转移法转化黑暗链霉
【机 构】
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常州方圆制药有限公司,福州大学生物科学与工程学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.31070093）, 国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目（No.2012ZX09201-101-008）
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通过敲除妥布霉素生物合成基因tobS1-C,定向选育阿泊拉霉素高产菌株。PCR扩增tobS1-C基因上下游同源序列和红霉素抗性基因ermE,构建穿梭载体pSH6,利用接合转移法转化黑暗链霉菌Tt49,经同源重组,敲除tobS1-C两基因序列,共2 484 bp,获得框内删除突变株黑暗链霉菌T103（△tobS1C）。发酵验证表明突变株不再合成妥布霉素,只合成阿泊拉霉素。
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