miR-30a-5p 靶向与调控SNAIL1抑制人胃癌细胞BGC-823的迁移

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:iis1
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已有研究表明, miR-30a-5p在胃癌中发挥抑癌基因的作用, 抑制胃癌细胞的增殖与侵袭, 但其抑制胃癌发生发展的机制尚不清楚。本文研究miR-30a-5p如何靶向调控SNAIL1, 进而影响人胃癌细胞BGC-823的迁移。通过qRT-PCR检测和TCGA数据库分析发现, miR-30a-5p的表达水平在胃癌组织与胃癌细胞BGC-823中均降低。利用划痕实验和Transwell实验检测发现, 在BGC-823细胞中转染miR-30a-5p mimics过表达miR-30a-5p后细胞迁移和侵袭明显被抑制, 而转染miR-30a-5p inhibitor降低miR-30a-5p表达水平时细胞迁移和侵袭能力提高。qRT-PCR和Western 印迹及免疫荧光检测发现,过表达miR-30a-5p细胞中波形蛋白(vimentin)和N-钙黏着蛋白(N-cadherin)的mRNA及蛋白质表达水平降低,而E-钙黏着蛋白(E-cadherin)表达水平升高。在miR-30a-5p inhibitor组中结果恰恰相反。通过生物信息学预测、双荧光素酶基因报告、Western 印迹及免疫荧光验证SNAIL1是miR-30a-5p作用的靶基因。在过表达miR-30a-5p的BGC-823细胞中进一步过表达SNAIL1,可以逆转miR-30a-5p的作用。该研究表明,miR-30a-5p可通过负调控靶基因SNAIL1的表达,进而抑制BGC-823胃癌细胞的迁移。本研究将为miR-30a-5p在胃癌发生发展中的作用机制提供理论依据, 并有望为胃癌治疗提供新靶点和生物标志物。
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