【摘 要】
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目的利用RNA干扰技术抑制食管癌细胞ECA109细胞MDC1基因表达,观察其对细胞周期和放射敏感性的影响。方法构建MDC1基因的干扰质粒pMDC1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合物共同转染
【基金项目】
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基金项目：国家自然科学基金（30470524,30870743）
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目的利用RNA干扰技术抑制食管癌细胞ECA109细胞MDC1基因表达,观察其对细胞周期和放射敏感性的影响。方法构建MDC1基因的干扰质粒pMDC1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合物共同转染293T细胞,收集病毒液,感染ECA109细胞,采用Real-TimePCR和western blotting测定MDC1在mRNA水平和蛋白水平的表达。采用流式细胞术和克隆形成实验,检测RNA干扰对ECA109细胞放射敏感性的影响。结果成功构建pMDC1-shRNA质粒,转染ECA109细胞,获得稳定转染细胞株ECA
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