【摘 要】
：
目的:研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,为其作为肝癌基因治疗的新分子靶点提供实验依据,并对RNAi实验方法的优化进行探讨。方法:构建2个针对STAT
【机 构】
：
泸州医学院医学细胞生物学与遗传学教研室,泸州医学院附属中医院肝病科,泸州医学院生理学教研室,
论文部分内容阅读
目的:研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,为其作为肝癌基因治疗的新分子靶点提供实验依据,并对RNAi实验方法的优化进行探讨。方法:构建2个针对STAT5A基因不同位点的RNA干扰(RNAi)真核表达载体,为减少脱靶效应和细胞毒性,采用两载体共转染的方法转染人肝癌细胞HepG2,分别采用半定量RT-PCR、蛋白质印迹法检测转染前后细胞中STAT5A mRNA和蛋白表达的变化;采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:酶切及测序结果显示,STAT5A基因两位点的shRNA表达载体均构建成功;两载体共转染HepG2细胞48h后,与对照组相比,RT-PCR结果显示实验组细胞中STAT5A mRNA的抑制率约为66%,P<0.05;蛋白质印迹法检测结果显示,STAT5A蛋白的抑制率约为58%,P<0.05;同时MTT法显示实验组较对照组在转染后24～96h内细胞生长速度减慢、增殖抑制明显(P<0.05),流式细胞仪检测实验组细胞凋亡率为(34.68±0.78)%,明显高于阴性对照组(5.12±1.09)%和空白组(4.75±1.65)%,P<0.05。结论:成功构建了针对STAT5A基因的RNA干扰真核表达载体,两载体共转染可有效抑制STAT5A基因的表达,并能抑制细胞生长、诱导细胞凋亡。
其他文献
目的了解老年2型糖尿病患者医学营养治疗（medical nutrition therapy,MNT）知晓情况。方法采用自行设计的问卷,调查2014年11月至2015年4月我院门诊及住院治疗的198例老年2型糖尿
相关检测是一种常见的水下目标检测方法，其性能易受到空间相关性衰减的影响。针对水下信号空间相关性衰减导致常规相关检测方法性能下降的现象，提出了一种基于正交匹配追踪的水
HLA-A2是发现最早、在人群中携带频率最高、呈高度多态性的Ⅰ类分子。目前已发现有30个基因亚型。现已弄清了HLA-A2的立体结构,属于免疫球蛋白基因超家族成员,通过与抗原肽、
目的探讨优质护理用于肝硬化腹水患者的临床效果。方法我院收治的肝硬化腹水患者150例,随机分为对照组和观察组,对照组给予常规护理,观察组给予心理护理、饮食指导、健康教育
最新统计数据显示乳腺癌已成为中国女性发病率最高的恶性肿瘤，成为妇女健康的最大威胁[1]。三阴性乳腺癌（triple—negativebreastcancer，TNBC）是指ER、PR、HER-2表达均缺失的特殊
今年是国家改革开放40周年,适逢渤海轮渡成立20周年。20年风雨兼程,20年砥砺奋进,渤海轮渡沐浴改革的春风,取得了一个又一个骄人的成就.
随着互联网络的飞速发展,新媒体已经超越传统媒体,成为曝光权利腐败等事件的主要媒介。重视新媒体在权力监督中的作用,借助新媒体的特点与优势,促进对权力的监督,实现了人民
社会的不断发展,经济体制的深入改革,不仅加剧了市场竞争,同时也提高了就业难度。在现代化教育下,创新创业能力成为了学生综合素质的重要组成部分,而作为培养学生综合素质的
研究中国政治,关键是要在中国政治的现实逻辑中发现中国政治的学术逻辑。这不仅要求我们加强在研究方法方面的学习和训练,而且要培养自己的整体性思维和抽象性思维;不仅要有
目的:血清分泌型卷曲蛋白5(serum secreted frizzled-related protein 5,SFRP5)是一种新发现的脂肪细胞因子,具有抗炎、抗动脉粥样硬化、改善胰岛素抵抗等特性。而炎症反应在