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目的 构建可溶性肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体TRAIL基因表达载体并研究其瞬时转染对肿瘤细胞凋亡的影响。方法 采用重叠延伸PCR法克隆含有TNF-α信号肽的人TRAIL基因,并将其连入pUCm-1载体。测序正确后克隆入表达载体pcDNA3.1中。采用Gene-Companion^TM非脂质体型聚阳离子转染试剂体外瞬时转染人膀胱癌EJ细胞,RT—PCR法检测目的基因mRNA水平的表达,Western blot检测细胞培养上清中目的基因的表达,流式细胞术检测细胞凋亡,克隆形成实验检测细胞存活。结果