【摘 要】
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目的 探讨达格列净(DAPA)对糖尿病(DM)小鼠肾的保护作用及机制.方法 选取10只8周龄SPF级db/db雄性DM小鼠为研究对象.将小鼠随机分为DM组与DAPA组,每组各5只.DM组连续口服喂养水12周;DAPA组连续口服喂养DAPA 12周.定期监测体质量和血糖.12周后,处死小鼠,留取小鼠血清及肾组织,检测小鼠血清中的尿素氮水平.对小鼠肾组织进行HE染色、Masson染色及PAS染色,评价小鼠肾的功能.小鼠肾组织行蛋白免疫印迹法和免疫组化染色检测炎症因子的表达水平.体外应用过氧化氢(H2 O2)刺
【机 构】
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东北大学 生命科学与健康学院,辽宁 沈阳110167;北部战区总医院 心血管内科,辽宁 沈阳110016
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目的 探讨达格列净(DAPA)对糖尿病(DM)小鼠肾的保护作用及机制.方法 选取10只8周龄SPF级db/db雄性DM小鼠为研究对象.将小鼠随机分为DM组与DAPA组,每组各5只.DM组连续口服喂养水12周;DAPA组连续口服喂养DAPA 12周.定期监测体质量和血糖.12周后,处死小鼠,留取小鼠血清及肾组织,检测小鼠血清中的尿素氮水平.对小鼠肾组织进行HE染色、Masson染色及PAS染色,评价小鼠肾的功能.小鼠肾组织行蛋白免疫印迹法和免疫组化染色检测炎症因子的表达水平.体外应用过氧化氢(H2 O2)刺激人胚肾细胞(AD293)模拟DM小鼠肾组织炎症,同时,给予达格列净0.4μmol/L、0.8μmol/L的剂量治疗,蛋白免疫印迹法检测细胞内炎症因子及相关基因的表达情况.结果 12周后,DAPA组小鼠血糖低于DM组,差异有统计学意义(P<0.05).与DM组小鼠相比,DAPA组小鼠的肾结构比较完整,肾小球内细胞数目有所增加,但未减小肾小球体积大小;DAPA组的肾小球硬化程度以及肾小球纤维化的现象有所缓解.与DM组比较,DAPA组小鼠血清尿素氮水平降低,肾质量及肾质量/体质量增加,差异有统计学意义(P0.05).DAPA组小鼠肾组织中P-P65(Ser-468)蛋白表达低于DM组,差异有统计学意义(P<0.05).与H2 O2组比较,H2 O2+DAPA 0.4μmol/L组、H2 O2+DAPA 0.8μmol/L组AD293细胞中SGLT2、P-P65(Ser-468)、P-P65(Ser-536)的蛋白表达明显降低,且H2O2+DAPA 0.8μmol/L组低于H2O2+DA-PA 0.4μmol/L组.结论 达格列净可能通过影响P65的磷酸化水平调节下游靶基因的活性,减轻炎症,缓解肾组织损伤.
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