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研究内皮抑素对NSCLC细胞(人肺腺癌A549细胞、人肺鳞癌Calu-1细胞)中VEGF受体2(VEGFR2)表达影响,并探索其放射增敏效应的可能机制。
方法CCK8法检测内皮抑素对细胞增殖抑制作用,计算24 h的20%药物抑制浓度(IC20);采用RT-PCR及蛋白印迹法检测各组VEGFR2、相关信号通路及HIF-1α mRNA与蛋白表达变化;克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性,流式细胞术检测凋亡及周期分布。多样本均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用两样本均数t检验。
结果经内皮抑素处理后,Calu-1细胞增殖活力明显下降(F=50.36,P<0.01),IC20=296.5 μg/ml;VEGFR2和HIF-1αmRNA与蛋白表达水平均受抑制(F=25.43、10.44,P值均<0.05);同时Akt、ERK1/2和p38的蛋白磷酸化水平均减低(F=2.89、0.24、1.09,P值均<0.05);其放射增敏比为1.38;凋亡率、G2+M期阻滞增加(F=44.15、104.24,P值均<0.01)。此外,与Calu-1细胞相比,内皮抑素对A549细胞放射增敏比为1.09。
结论内皮抑素能促进VEGFR2高表达Calu-1细胞凋亡并能增强放射敏感性,对低表达的A549细胞效果有限。