重组人IL-6／IL-2融合蛋白的高密度发酵和纯化

来源 :高技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guigui198302

【摘要】

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克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达.发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30%～50%.发酵液中最终菌体密度(OD6

【作者】

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李董袁文肃马小彤蔡辉国明宇李静赵春华

【机构】

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中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

【出处】

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高技术通讯

【发表日期】

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2003年11期

【关键词】

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白细胞介素纯度离子交换层析凝胶过滤层析大肠杆菌 IL-6/2 fusion protein fermentation purification

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划)，国家重点基础研究发展计划(973计划)

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克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达.发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30%～50%.发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融合蛋白呈包涵体形式.表达蛋白占菌体总蛋白的30%左右.菌体经过超声破碎后反复洗涤包涵体,融合蛋白纯度达到70%,进一步用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化使其纯度达95%以上.IL-6/2融合蛋白中的IL-6和IL-2活性分别为1×1

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