【摘 要】
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目的研究新藤黄酸（Gambogenic acid,GNA）诱导A549细胞凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测0.5,1.0,2.0,4.0,8.0μmol·L-1的GNA作用于A549细胞24 h后
【机 构】
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安徽中医药大学,中国科学院成都生物研究所,安徽中医药大学科研实验中心,新安医学教育部重点实验室,
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目的研究新藤黄酸（Gambogenic acid,GNA）诱导A549细胞凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测0.5,1.0,2.0,4.0,8.0μmol·L-1的GNA作用于A549细胞24 h后细胞的增殖情况;采用Hoechst 33342和Annexin V-FITC/PI染色法,于荧光显微镜下观察1.25,2.5,5.0μmol·L-1的GNA作用细胞24 h后的凋亡形态;流式细胞仪检测1.25,2.5,5.0μmol·L-1的GNA作用细胞24 h后的凋亡率;Western Blot法检测1.25,2.5,5.0μmol·L-1的GNA处理细胞24 h后,Ras、Raf、Erk和p-Erk的表达。结果GNA能够显著降低A549细胞的活力,并呈浓度依赖性抑制细胞增殖,24 h的IC50为2.507μmol·L-1;Hoechst33342和AV/PI染色后,于荧光显微镜下观察发现,细胞显示明显的凋亡特征;流式细胞仪检测结果表明,随着GNA浓度的升高,细胞的凋亡比率逐渐上升;Western Blot法检测显示GNA能够抑制Ras、Raf、p-Erk1/2蛋白的表达。结论 GNA能够诱导A549细胞凋亡,其作用可能与通过调控Ras/Raf/Erk信号通路有关。
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