慢性粒细胞白血病MGMT基因的克隆及逆转录病毒表达载体的构建

来源 :贵阳医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liang672369282
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目的:从慢性粒细胞白血病病人外周血中克隆人MGMT基因,并进行逆转录病毒表达载体的构建.方法:用RT-PCR方法从慢性粒细胞白血病病人外周血白细胞中克隆得到长为 684 bp MGMTcDNA.将该片段与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌DH5后得到重组质粒pGEM -T-MGMT,进行限制性内切酶酶切分析、PCR及测序鉴定.再将MGMTcDNA亚克隆到G1Na逆转录病毒载体EcoRⅠ和xhoⅠ位点之间,并进行酶切、PCR鉴定.结果:成功克隆了人MGMT基因,经酶切分析、PCR初步筛选及测序鉴定证实序列正
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