重组溶瘤痘病毒rVV-CCL5-SSTR2-Luc+的构建及其杀瘤活性

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gb1107

【摘要】

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目的在体外构建携带CCL5和SSTR2双基因的重组溶瘤痘病毒,并初步检测其溶瘤活性。方法利用基因工程策略,分步构建重组痘病毒真核表达质粒pSC65-CCL5-SSTR2-Luc+;经同源重组痘

【作者】

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李丹洋方敬敬唐慧

【机构】

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云南省第一人民医院/昆明理工大学附属医院临床基础医学研究所云南省临床病毒学重点实验室昆明市肿瘤分子与免疫防治重点实验室,昆明理工大学医学院

【出处】

：

基础医学与临床

【发表日期】

：

2020年4期

【关键词】

：

溶瘤痘病毒同源重组 CCL5 SSTR2 oncolytic vaccinia virushomologous recombinationCCL5SSTR2

【基金项目】

：

国家自然科学基金(81460463),云南省卫生和计划生育委员会医学学科带头人培养基金(D-201642),云南省科技厅科技计划[2019FE001(-173)],云南省临床病毒学重点实验室基金(2018DG010),昆明市肿瘤分子与免疫重点实验室基金(2018-1-A-17334)

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目的在体外构建携带CCL5和SSTR2双基因的重组溶瘤痘病毒,并初步检测其溶瘤活性。方法利用基因工程策略,分步构建重组痘病毒真核表达质粒pSC65-CCL5-SSTR2-Luc+;经同源重组痘病毒Western Reverse(WR)株和23轮筛选纯化后,获得纯化的重组溶瘤痘病毒rVV-CCL5-SSTR2-Luc+;经扩大培养及浓缩纯化后获得高滴度的重组溶瘤痘病毒,用ELISA和Western blot分别验证感染重组溶瘤痘病毒的HeLa细胞CCL5和SSTR2的表达变化;用CCK-8法检测了rVV-C

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