梅花鹿colX基因的克隆及原核表达

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wpaghq
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
提取健康梅花鹿鹿茸肥大软骨细胞总RNA,以RT-PCR获得colX基因2038bp的完整编码序列,将其克隆入载体pMD18-T中,经限制性内切酶和质粒PCR分析,并测序证实的阳性重组子与表达载体pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)。以IPTG诱导,经SDS-PAGE及Western-blot分析表明,获得相对分子质量为65000的colX蛋白表达带,与预期相符,表明成功获得梅花鹿colX基因蛋白。
其他文献
选用1日龄天府肉鸭360只,随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu8mg/kg)和高铜日粮(Cu100mg/kg为高铜Ⅰ组,Cu200mg/kg为高铜Ⅱ组,Cu400mg/kg为高铜Ⅲ组,Cu600mg/kg为高铜Ⅳ组,Cu800mg/kg为高铜Ⅴ
以父母代肉种鸡为材料,以血浆极低密度脂蛋白(very low density lipoprotein,VLDL)质量浓度为选择指标建立肉鸡高脂系和低脂系,个体测定一世代高、低脂系母鸡产蛋性能、种蛋受精率
以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板.根据已发表的Ag85B成熟蛋白基因的核苷酸序列设计合成特异性引物进行PCR扩增.获得约860bp的DNA片段。通过T-A克隆技术.将PCR产物克隆至pG
通过两侧翅内侧皮肤无血管处刺种和滴鼻、点眼等途径给10日龄商品蛋公鸡接种鸡痘病毒(FPV)弱毒疫苗株,利用PCR的方法检测其在鸡体内的分布与消长规律并对其毒性进行了研究。刺种
取新生奶牛肋骨,剪成1 mm3大小骨片,胰蛋白酶消化5次,D-Hank’s液彻底冲洗后,骨片置于含15%FBS的DMEM中培养,获取单层细胞。采用倒置显微镜下观察细胞形态,改良钙-钴法染色,
选用Sat2、Sat3、Sat4、Sat5、Sat7、Sat8、Sat12、Sat13、Sat16、Sol08、Sol28、Sol30、Sol03等13个微卫星位点PCR扩增60只吉戎兔的基因组DNA,然后在8%聚丙烯酰胺凝胶上电泳
采用微量稀释法测定了32种药物对临床分离猪链球菌的体外最小抑菌浓度(MIC),以美国临床检验标准委员会(NCCLS)的临界浓度做为判断标准,判定了猪链球菌2型对10种β-内酰胺类药物的耐
采用自身对照试验,以自然感染栉首蚤(Ctenocephalides sp.)的犬与猫为试验动物,验证常熟市金牧药业有限公司生产的灭蚤项圈(犬用、猫用)对蚤的杀灭与防治效果。结果表明:在整个试验期