KAAD-环巴胺抑制Hedgehog信号通路对人鳞状细胞癌细胞株A431生长及凋亡的影响

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目的 探讨Hedgehog信号转导通路的特异性抑制剂KAAD-环巴胺对人鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用MTT法测定KAAD-环巴胺对A431细胞的增殖抑制情况,光镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测KAAD-环巴胺对A431细胞周期的影响,用Annexin-V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率的变化.结果 MTT结果显示0.5,1,2,5 μmol/L KAAD-环巴胺对A431细胞的生长抑制率依次为(7.0±2.3)%,(20.6±2.8)%,(48.3±3.4)%和(61.6±3.3)%,F=49.92,P<0.01;5μmol/L KAAD-环巴胺作用1~5 d的生长抑制率分别为(18.3±2.6)%,(56.1±3.7)%,(65.4±2.8)%,(71.2±1.9)%,(75.9±3.0)%,F=16.32,P<0.01,表明KAAD-环巴胺可显著抑制A431细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性:r浓度=0.91,P<0.01;r时间=0.86,P<0.05.光镜下细胞形态明显受损.细胞周期结果显示KAAD-环巴胺作用组G1期细胞数为(76.2±1.8)%,较空白对照(51.8±2.9)%明显增加,F=26.34,P<0.01,G1期前亚二倍体峰由空白对照组(1.7±0.3)%增至(8.7±0.2)%,F=6.32,P<0.05,表明KAAD-环巴胺可以将A431阻滞于G1期.凋亡检测结果显示KAAD-环巴胺可以明显诱导A431细胞发生凋亡,凋亡率由空白对照(18.5±3.1)%增至(46.2±2.8)%,F=32.01,P<0.01.阴性对照组实验结果与空白对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 Hedgehog信号通路的特异性抑制剂KAAD-环巴胺能够显著抑制A431细胞增殖并诱导其凋亡.
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