Let-7a表达质粒的构建及其对肺癌A549细胞k-Ras蛋白表达的抑制作用

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aihechashui

【摘要】

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目的探讨let-7a介导的基因表达调控在肺癌形成中的作用。方法依据miRBase数据库中hsa-let-7a序列,设计两条寡核苷酸片段,退火处理后克隆至pGenesil-1质粒,构建重组质粒pGenes

【作者】

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何晓燕陈俊霞欧阳溪张政彭惠民

【机构】

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重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室,重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心

【出处】

：

南方医科大学学报

【发表日期】

：

2010年11期

【关键词】

：

微RNA let-7a 肺癌 K-RAS 基因表达 microRNA let-7a lung cancer k-Ras gene expression

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目的探讨let-7a介导的基因表达调控在肺癌形成中的作用。方法依据miRBase数据库中hsa-let-7a序列,设计两条寡核苷酸片段,退火处理后克隆至pGenesil-1质粒,构建重组质粒pGenesil-let-7a,同时设计并构建一个阴性对照质粒pGenesil-control。将pGenesil-let-7a及pGenesil-control转染肺癌A549细胞,经G418筛选,建立稳定表达let-7a-GFP及control-GFP的细胞株。采用MTT比色法检测活细胞数并绘制生长曲线;半定量RT

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