秋水仙素对脑胶质瘤细胞体外抑制和对海马神经元细胞缺氧/复氧保护作用的研究

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stefanie456
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目的:探讨秋水仙素对体外培养的脑胶质瘤细胞的抑制作用以及秋水仙素对HT22细胞缺氧/复氧损伤的作用及机制.方法:CCK-8检测10 ng/ml、20 ng/ml、30 ng/ml和40 ng/ml的秋水仙素对脑胶质瘤细胞U87的增殖作用,正常培养U87细胞作为空白对照组;30 ng/ml的秋水仙素给药处理为实验组,通过qRT-PCR和Western blot观察U87增殖和凋亡标志蛋白的变化以及PIK3/AKT信号通路变化;HT22细胞体外构建糖氧剥夺(OGD)模型;秋水仙素预处理后检测细胞活力、ROS表达水平及线粒体膜电位的变化;ELISA检测细胞培养液中缺血性脑卒中标志因子MMP-9和CRP的表达变化.结果:CCK-8检测结果显示10 ng/ml、20 ng/ml、30 ng/ml、40 ng/ml和50 ng/ml秋水仙素对U87增殖抑制作用呈浓度依赖性;秋水仙素给药组细胞促凋亡蛋白Caspase-3、Bcl-2及Cyclin-D1表达显著降低,抑癌基因Bax和p53表达显著升高;同时秋水仙素抑制PIK3/AKT信号通路的激活.HT22细胞体外构建OGD模型,秋水仙素给药组促进HT22细胞活力,显著降低ROS、线粒体膜电位和MMP-9和CRP的表达及变化;同时抑制Caspase-3、Bcl-2以及Cyclin-D1表达;PIK3/AKT信号通路同样被抑制.结论:秋水仙素通过抑制PIK3/AKT信号通路抑制人脑胶质瘤细胞U87的增殖同时有效减少OGD模型诱导的HT22细胞损伤.
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