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目的
研究DNA-PKcs在细胞辐射超敏感性中的作用。
方法X射线照射M059K和M059J细胞后,克隆形成法实验检测其存活分数;微核分析法和γ-H2AX焦点形成实验检测DNA损伤;Western blot实验检测M059K,M059J细胞中磷酸化Chk1、Chk2和总Chk1、Chk2蛋白的表达。
结果在X射线照射剂量<1 Gy时,M059K细胞呈现出辐射超敏感性;DNA损伤水平不能用于表征低剂量区的HRS/IRR;0.2 Gy X射线照射后,M059K细胞中pChk1/Chk1在20~60 min内显著高于M059J细胞(t=14.157、13.661、14.177、11.317、14.512, P<0.05);0.2 Gy X射线照射后,M059K细胞中pChk2/Chk2在20~50 min内显著高于M059J细胞(t=13.182、13.868、14.155、14.477, P<0.05)。
结论DNA-PKcs野生型的人胶质瘤M059K细胞中存在着低剂量辐射超敏感性现象,其发生可能与DNA-PKcs介导的G2/M期检验点相关蛋白激活有关。