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从半连续进料的奶牛粪二级常温沼气发酵池,连续稳定运行一年后的的发酵液中,采用Hungate厌氧操作技术,进行发酵各阶段细菌类群数量的测定。以十倍稀释法,分别采用相应培养液,以最大概率数（MPN）法计算三个类群细菌的数量。以氢、乙酸和甲烷的形成作为三个类群细菌生长的指标。每毫升发酵液中发酵性细菌的数量为5.37×1010,产氢产乙酸细菌的数量为2.41×10~8,产甲烷细菌的数量分别为8.96×10~5（液体培养法）和1.15×10~6（滚管法）。