【摘 要】
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为探讨缺氧后适应(hypoxic postconditioning,HPC)中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)对心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的作用及其机制,将H9C2心肌细胞分为4组:对照组(常氧培养10 h)、H/R组(缺氧4h后复氧6 h)、HPC组(缺氧4h后行复氧5 min/缺氧5 min,共3次,再复氧6 h)、HPC+槲皮素(quercetin,Quer)组(缺氧前1h加50 μmol/L的HSP70抑制剂
【机 构】
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宣城市人民医院心血管内科,宣城242000;广西医科大学第一附属医院心内科,南宁530022;广西医科大学第一附属医院心内科,南宁530022;宣城市人民医院心血管内科,宣城242000
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为探讨缺氧后适应(hypoxic postconditioning,HPC)中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)对心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的作用及其机制,将H9C2心肌细胞分为4组:对照组(常氧培养10 h)、H/R组(缺氧4h后复氧6 h)、HPC组(缺氧4h后行复氧5 min/缺氧5 min,共3次,再复氧6 h)、HPC+槲皮素(quercetin,Quer)组(缺氧前1h加50 μmol/L的HSP70抑制剂Quer后行HPC).采用Hoechst 33242染色观察细胞形态变化,FACS检测细胞凋亡情况,Western blotting检测HSP70、TLR4、NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-6、B淋巴细胞瘤2基因(B-cell lym-phoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、Caspase-3蛋白表达水平.结果 显示,HPC组HSP70、Bcl-2表达水平较H/R组显著升高(P＜0.05),TLR4、NF-κB p65、TNF-a、IL-1 β、IL-6、Bax、Caspase-3表达水平较H/R组显著下降(P＜0.05);HPC+Quer组HSP70、Bcl-2表达水平较HPC组显著下降(P＜0.05),TLR4、NF-κB p65、TNF-α、IL-1 β、IL-6、Bax、Caspase-3表达水平较HPC组显著升高(P＜0.05).该研究提示,HPC可通过上调HSP70表达抑制TLR4/NF-κB信号通路,减轻H/R诱导的心肌细胞免疫炎症损伤.
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