2型糖尿病线粒体ND1基因3个新突变位点的分析

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目的 探讨线粒体DNA tRNA Leu (UUR)基因和ND1基因点突变(np 3 243、3 316、3 394和3 593)与湖北人群2型糖尿病的相关性.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP),克隆和测序的分析方法,对184例2型糖尿病患者和210名健康对照进行筛选,并用DNAMAN、Primer、mfold和Antherprot软件对检出的突变位点进行分析和二级结构预测.结果实验组检出3 316 (G→A)突变6例 (3.3%),3 394 (T→C)突变5例 (2.7%),3 593 (T→C)突变1例(0.5%),并发现3个尚未见报道的新突变位点:3 606(A→G)、3 618(T→C)和3 688(G→C),未检出3 243(A→G)突变;对照组只检出3 316 ( G→A)突变1例 (0.5%).两组间仅3 394 (T→C)突变率差异有统计学意义(P<0.05).3 606 (A→G)和3 618 (T→C)突变分别为亮氨酸、苯丙氨酸的无意义突变,其二级结构均与野生型ND1相同;3 316 (G→A)突变(丙氨酸→苏氨酸),3 394 (T→C)突变(酪氨酸→组氨酸),3 593 (T→C)突变(缬氨酸→丙氨酸),3 688 (G→C)突变(丙氨酸→脯氨酸),均引起ND1基因DNA和蛋白质二级结构的改变,其中3 394(T→C)突变型变化最显著.结论线粒体DNA ND1基因3 394 (T→C) 突变以及3 688 (G→C)突变伴随3 316(G→A)突变,可能与2型糖尿病的发生发展有关。

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