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目的：探寻体外分离培养大鼠成熟脂肪细胞的最佳方法。方法：采用器官培养法、天花板培养法和改良天花板培养法3种不同的原代培养方法，体外培养大鼠成熟脂肪细胞。通过观察显微镜下细胞形态及油红O染色结果，比较3种培养方法所培养的脂肪细胞的差异。结果：3种培养方法均培养出成熟的脂肪细胞，细胞形态一致，其中改良天花板培养法的培养效率最高，培养出的细胞形态最好。结论：改良天花板培养方法是一种长期稳定的大鼠成熟脂肪细胞原代培养方法，为进行脂肪细胞的相关研究提供良好的技术平台。