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目的
探讨核糖核酸(RNA)在基因水平上干涉血小板源性生长因子(PDGF)的转录与表达,从而抑制视网膜色素上皮细胞(RPE)增生的机制,以期对外伤性PVR的防治提供帮助。
方法针对PDGF基因的小干扰核糖核酸(siRNA)序列设计引物,体外转录、转染细胞,寻找具有高效干涉作用的siRNA序列,利用构建具有体内转录siRNA功能的慢病毒载体转染培养的RPE细胞,采用生长曲线及噻唑蓝比色法(MTT)检测PDGF siRNA-慢病毒抑制RPE细胞增生的作用,并用流式细胞仪检测细胞周期的变化。
结果获得具有高效干涉PDGF表达的siRNA序列,构建出转录该siRNA序列的慢病毒载体,且转染RPE细胞后可抑制RPE细胞增生。
结论利用RNA的干涉作用,在基因水平上抑制PDGF的转录与表达,从而抑制RPE细胞的增生。