【摘 要】
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目的构建适于高通量筛选的激活素受体样激酶4（ALK4）,ALK5和ALK7抑制剂的筛选模型。方法利用Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统,构建ALK4激酶结构域（ALK4kd）,ALK5kd和ALK7kd及Smad2
【机 构】
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军事医学科学院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,北京师范大学生命科学学院
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目的构建适于高通量筛选的激活素受体样激酶4（ALK4）,ALK5和ALK7抑制剂的筛选模型。方法利用Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统,构建ALK4激酶结构域（ALK4kd）,ALK5kd和ALK7kd及Smad2和Smad3蛋白的病毒表达系统,转染Sf9昆虫细胞,表达目的蛋白;通过谷胱甘肽S-转移酶（GST）亲和柱纯化,获得纯化的目的蛋白;分别以纯化的ALK4,ALK5,ALK7激酶片段与纯化的Smad3和ATP构建ALK4,ALK5,ALK7激酶活性测定体系,优化各反应底物浓度及反应条件,建立适
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