【摘 要】
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目的:建立一种简易、快速检测细胞内外源性基因稳定表达的方法.方法:以携带绿色荧光蛋白的真核表达质粒pEGFP-N1为骨架,将完整的 hOSM基因ORF克隆到pEGFP-N1上游的多克隆位点
【机 构】
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解放军总医院第309临床部,解放军总医院,军事医学科学院二所十室,军事医学科学院
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目的:建立一种简易、快速检测细胞内外源性基因稳定表达的方法.方法:以携带绿色荧光蛋白的真核表达质粒pEGFP-N1为骨架,将完整的 hOSM基因ORF克隆到pEGFP-N1上游的多克隆位点,构建表达载体pOSM-EGFP-N1,脂质体介导转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),G418筛选,挑选阳性克隆.荧光显微镜、流式细胞术分析转染了pOSM-EGFP-N1质粒的CHO细胞纯度.RT-PCR的方法分析OSM基因水平表达.结果:成功建立稳定表达OSM的CHO细胞株(CHO-OSM-EGFP),纯度达到99.76%
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