芥子气对人皮肤角质细胞DNA损伤效应的研究

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目的探究芥子气对人永生化表皮角质形成细胞(HacaT细胞)DNA损伤的毒性作用特征及机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度芥子气对HacaT细胞增殖的抑制作用,AnnexinⅤ-FITC法检测芥子气对HacaT细胞凋亡指数的影响,单细胞凝胶电泳法检测芥子气对HacaT细胞DNA的损伤,Western印迹法检测芥子气对HacaT细胞DNA损伤修复相关蛋白的影响。结果不同浓度芥子气作用HacaT细胞24 h后,对细胞的增殖均有抑制作用(P<0.05),并呈明显的剂量依赖性,其半数抑制浓度IC50值为121μmol/L;HacaT细胞的凋亡指数和彗星拖尾率随芥子气浓度的增加而增加;不同浓度芥子气染毒可导致DNA损伤修复相关蛋白表达量及活性的改变。结论芥子气对HacaT细胞具有明显的细胞毒性作用,可引起细胞凋亡并产生明显的DNA损伤,ATM-P53-γH2AX-PARP信号通路在芥子气导致DNA损伤修复过程中发挥重要作用。
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