【摘 要】
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目的:探讨细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)在脊髓缺血再灌注损伤中的作用及机制.方法:20只新西兰大白兔随机分成4组,每组5只,分别为对照
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院骨科,南京医科大学第一附属医院康复科
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目的:探讨细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)在脊髓缺血再灌注损伤中的作用及机制.方法:20只新西兰大白兔随机分成4组,每组5只,分别为对照组(A组)、缺血30mir/再灌注15min组(B组)、缺血30mir/再灌注1h组(C组)、缺血30min/再灌注24h组(D组),脊髓缺血再灌注损伤模型应用腹主动脉阻断法制作.光镜及电镜观察各组脊髓组织病理变化,Western blot检测脊髓组织中ASK1的蛋白表达及活化情况,免疫共沉淀分析ASK1与14-3-3蛋白间相互作用,免疫组织化学染色观察活化ASK1(pASK1)及14-3-3蛋白在细胞内的定位表达.结果:光镜检查B组的脊髓组织形态学与A组比较无明显改变,C组及D组脊髓间质明显出血,神经细胞肿胀;电镜检查C组及D组神经细胞出现细胞核浓缩、染色质聚边、脱髓鞘改变等早期凋亡征象;Western blot蛋白电泳显示B组ASK1无明显活化,C组及D组ASK1显著活化;免疫共沉淀分析提示ASK1与14-3-3蛋白在C组及D组发生蛋白分离;免疫组织化学染色显示缺血再灌注时pASK1与14-3-3蛋白均在细胞浆内表达.结论:ASK1介导的凋亡信号转导途径参与脊髓缺血再灌注的损伤过程,14-3-3蛋白与ASK1蛋白的分离可能是导致ASK1活化的机制之一.
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