【摘 要】
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目的构建2a型丙型肝炎病毒(HCV)非结构基因(NS)5区全长克隆质粒.方法用聚合酶链反应(PCR)从HCV NS5A和NS5B质粒中扩增出NS5A和NS5BPCR片段,再采用融合PCR技术扩增出全长NS5的
【机 构】
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徐州第四人民医院传染科,221002,北京大学肝病研究所
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目的构建2a型丙型肝炎病毒(HCV)非结构基因(NS)5区全长克隆质粒.方法用聚合酶链反应(PCR)从HCV NS5A和NS5B质粒中扩增出NS5A和NS5BPCR片段,再采用融合PCR技术扩增出全长NS5的cDNA片段,克隆后RFLP和序列分析鉴定重组子.结果融合PCR获得约2.8kb全长NS5序列,同源性分析表明:与HC-J6的核苷酸同源性为91.2%,推导的氨基酸同源性为95.5%.结论利用融合PCR技术简单方便,利用该技术获得了2a型HCV NS5全长序列,构建了全长基因克隆质粒.
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