【摘 要】
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目的检测Renca细胞exosomes对CD8~+T细胞的激活效应以及exosomes负载的树突状细胞(DCs)所诱导的CD8~+T细胞对Renca细胞特异性杀伤作用。方法采用超速离心法从Renca细胞无血清
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院泌尿外科;
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目的检测Renca细胞exosomes对CD8~+T细胞的激活效应以及exosomes负载的树突状细胞(DCs)所诱导的CD8~+T细胞对Renca细胞特异性杀伤作用。方法采用超速离心法从Renca细胞无血清上清液中提取出exosomes并鉴定,体内通过流式和ELISA;体外通过CFSE荧光染色和ELISA检测exosomes对CD8~+T细胞的激活效应。小鼠骨髓分离出DCs并进行体外培养,用exosomes冲击成熟的DCs然后活化CD8~+T细胞,测定其对Renca、4T1、CT26细胞的杀伤率。结果透射电镜下观察exosomes是直径在30～100 nm的盘状囊泡,Western blot检测exosomes高表达MHC-1和HSP70。Exosomes能在体内和体外促进CD8~+T细胞的增殖和激活效应。在体外杀伤实验中,exosomes冲击的DCs所诱导的CD8~+T细胞相对于4T1和CT26细胞,其对Renca细胞具有明显更强的杀伤作用。结论 Renca细胞exosomes对CD8~+T细胞具有明显的激活作用且exosomes负载的DCs所诱导的CD8~+T细胞对自体肿瘤细胞具有强烈的特异性杀伤能力。
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