论文部分内容阅读
目的体外培养脂多糖(LPS)诱导的初生小牛关节软骨细胞炎症损伤模型并以青藤碱(SN)干预，从而研究SN对关节软骨细胞的保护作用。方法无菌分离并体外培养初生小牛的膝关节软骨细胞，以不同浓度组LPS刺激细胞诱导炎症损伤模型，比色法检测培养液上清中的一氧化氮(N0)生产量，MTT法检测不同浓度SN对正常培养细胞活力的影响，从而选择合理的造模及给药剂量;以低、中、高3种剂量的SN干预LPS诱导的软骨细胞炎症损伤模型，并设立模型对照组、空白对照组，检测各组细胞培养液上清中的NO丙二醛(MDA)产生量，检测一氧化氮合成酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性，分析SN对细胞炎症损伤模型的干预作用。结果 各浓度LPS均能剂量依赖性地促进软骨细胞产生NO，依次为(11.0±0.4)、(16.7±0.5)、(21.0±0.7)、(26.3±0.6)、(42.4±0.5)、(52.4 ±0.9)、(72.3±0.5)μmol/L，分别与空白组比较，差异均有统计学意义(P值均＜0.01)。MTT法检测各浓度SN作用下软骨细胞相对活力，OD值分别为0.44±0.01、0.43 +0.02、0.44±0.01、0.43±0.02、0.43±0.02，分别与空白组差异均无统计学意义(P值均＞0.1)。未加SN干预LPS组与对照组NO、MDA、NOS、SOD比较差异有统计学意义，t值分别为-135.0、-16.1、-150.4、32.3，P值均＜0.01。加入各浓度SN的LPS组分别与不加SN的LPS组比较NOS释放量SN组较低，t值分别为-74.7、-33.5、-43.4，P值均＜0.01;分别比较NO释放量SN组较低，t值分别为-11.4、-7.1、-5.5，P值均＜0.01;分别比较SOD活力SN组较高，t值分别为-105.5、-40.3、-20.5，P值均＜0.01;分别比较MDA产生量SN组较低，t值分别为21.5、10.7、17.7，P值均＜0.01，差异有统计学意义，且呈一定的剂量依赖性。结论SN能对抗LPS诱导的脂质过氧化及炎性损伤，提高软骨细胞的超氧化物歧化酶活性，提高氧自由基清除水平，对软骨细胞具有保护作用。