建立靶向生长激素促泌素受体1a(GHSR1a)基因短发夹干扰RNA(shRNA)慢病毒表达载体，感染至人直肠癌细胞株SW480，观察沉默GHSR1a基因对体外SW480细胞生长和凋亡的影响。
方法Western blot检测GHSR1a在人直肠癌Caco-2和SW480细胞及人正常结肠上皮细胞株NCM460中的表达；构建特异性靶向GHSR1a基因的shRNA慢病毒表达载体和阴性对照序列慢病毒载体；通过慢病毒感染建立稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞(KD)、阴性对照细胞(NC)及空白对照细胞(BC)，反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GHSR1a mRNA在细胞中的表达；通过Western blot技术检测细胞中GHSR1a蛋白的表达；细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定感染GHSR1a shRNA后对SW480细胞增殖的影响；流式细胞术检测细胞凋亡。
结果在体外实验中，GHSR1a蛋白在Caco-2和SW480细胞中的表达水平分别为89.24±12.95和124.82±17.67，明显高出NCM460细胞中的表达水平(23.51±4.28)；通过荧光表达及流式细胞学结果表明成功建立稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞；SW480细胞感染GHSR1a shRNA后，GHSR1a蛋白在BC、NC和KD组中的表达分别为73.27±8.69、69.82±7.14和11.73±1.94，GHSR1a mRNA在BC、NC和KD组中的相对表达量分别为124.31±14.78、136.62±17.20和38.94±4.13，KD组细胞中GHSR1a蛋白及mRNA的表达明显低于BC组或NC组(P＝0.000)；沉默GHSR1a基因72 h后，KD组细胞增殖较BC组下降(32.24±3.67)%，差异有统计学意义(P＝0.002)；感染GHSR1a shRNA 72 h后，BC、NC和KD组细胞早期凋亡率分别为(2.3±0.5)%、(3.4±0.6)%和(12.4±3.5)%，KD组细胞早期凋亡率明显高于BC组或NC组(P＝0.000)。
结论慢病毒介导的GHSR1a shRNA对体外人直肠癌细胞生长有明显抑制作用，并促进细胞凋亡，表明GHSR1a基因有可能具有影响直肠癌发生发展的作用。