目的探讨一氧化氮(NO)、细胞内游离钙离子等在肝移植缺血再灌注损伤中的变化和作用机制.方法实验选用18只狗,分为二组,供体组(n=9),受体组(n=9).肝移植的方法采用经典的背驮式.观测指标包括①肝脏功能指标:胆汁生成量、血ALT(肝组织的获取分别于开腹后、门静脉再灌注前、再灌注开始后半h时、再灌注后2 h、6 h、12 h切取肝脏组织病同时检验血中ALT含量及胆汁流量;②肝细胞活性及功能:肝细胞含水量、肝细胞内游离钙含量、肝细胞的凋亡、肝组织的NO测定,以上各项测定在不同时期有不同的变化,但再灌注6 h时均达到最高峰.结果①细胞含水量:肝脏含水量在低温灌注时仅略有升高,与术前无显著性差异;再灌注各时间段与术前、低温灌注比较具有显著性差异(P≤0.01).而再灌注各时间段之间无显著性差异(P＞0.05),再灌注6 h时,肝脏含水量达到最高峰.②肝细胞内游离钙[Ca2+]i含量:缺血再灌注时均发生显著性升高(P≤0.01).在再灌注6 h时[Ca2+]i荧光强度达到最高峰,且与其他再灌注时间段有显著性差异(P≤0.01).[Ca2+]i在缺血再灌注2h和6h与其他时间段有显著性差异(P＜0.05).③肝细胞凋亡:缺血再灌注时均发生显著性升高(P≤0.01).在再灌注6 h时细胞凋亡率达到最高峰,且与其他再灌注时间段有显著性差异(P≤0.01).细胞凋亡率在缺血再灌注各时间段之间也都有显著性差异(P≤0.01).④肝组织NO生成:肝脏NO于低温灌注时已显著升高,再灌注0.5 h、2 h继续升高;6 h达到最高峰,12h已明显下降低于低温灌注时NO的量,但未达到术前水平.每组与术前比较均有显著性差异(P≤0.01).再灌注0.5 h、2 h、6 h时与其他时间比较均有显著性差异(P≤0.05),而0.5 h、2 h、6h之间无显著性差异(P＞0.05).他们之间的变化密切相关.结论从试验结果看,胆汁分泌是观测肝功能直观指标,ALT可以作为观察肝脏损伤的客观指标.再灌注后出现ALT持续增加,说明在缺血再灌注中肝脏存在着明显、持续性的损害.再灌注过程中所产生的内源性NO的变化与[Ca2+]i、细胞含水量和细胞凋亡成平行关系,但NO在肝脏缺血再灌注时,所起的作用是积极、还是消极的,有待进一步试验证实.本试验再灌注过程中,NOS的持续增加,是由依赖钙离子的cNOS增加,还是i-NOS增加也有待进一步免疫组化检验确定.