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目的
建立大鼠骨骼肌卫星细胞的分离和培养方法,探讨骨骼肌卫星细胞复合聚羟基乙酸(PGA)材料在体外共培养的可行性。
方法酶消化法获取原代骨骼肌卫星细胞,经体外培养和扩增后,组织学检测骨骼肌卫星细胞标志性蛋白的表达,将慢病毒载体介导绿色荧光蛋白(GFP)转染后的骨骼肌卫星细胞接种于PGA上,形成骨骼肌卫星细胞-PGA材料复合物,体外培养1周后,进行光镜及扫描电镜观察。
结果培养的骨骼肌卫星细胞表达结蛋白(Desmin)和波形蛋白(Vimentin)阳性,光镜下观察显示转染后的骨骼肌卫星细胞在PGA纤维上增殖并分泌大量的细胞外基质,扫描电镜显示细胞分泌的细胞外基质将PGA纤维之间的孔隙充满。
结论转染后的骨骼肌卫星细胞复合PGA后生长良好,GFP可作为骨骼肌卫星细胞研究的示踪标记。