3种嗜热β-葡萄糖苷酶催化黄芩苷生产黄芩素的研究

来源 :中国中药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaosheng2099
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该文分析了来自嗜热菌Thermotoga thermarum DSM 5069的Ttebgl3和Thermotoga petrophila RKU-1的Tpebgl1,Tpebgl3等3种β-葡萄糖苷酶基因及其序列,比较了3种β-葡萄糖苷酶催化转化黄芩苷的最适温度、p H以及DMSO、金属离子对催化转化黄芩苷的影响,并比较了3种β-葡萄糖苷酶转化黄芩苷的动力学常数。结果表明,Tpebgl1,Tpebgl3,Ttebgl3转化黄芩苷的最适pH分别为4.5,5.0,5.5,最适温度为85,80,80℃。Tpebgl3酶和Ttebgl3酶催化转化黄芩苷时对DMSO的耐受性较好。金属离子对3种β-葡萄糖苷酶催化转化黄芩苷的激活作用不明显,GH3家族β-葡萄糖苷酶受到的抑制作用明显强于GH1家族。3种β-葡萄糖苷酶催化黄芩苷的动力学常数存在较大差异,Tpebgl1,Tpebgl3,Ttebgl3酶的Km分别为0.029 2,0.268 6,0.391 8 mmol·L-1,Vmax分别为4.85,121.04,308.90 U·mg-1。Tpebg1,Tpebgl3,Ttebgl3酶分别在其最适pH,温度下转化0.02 g黄芩苷,3 h后转化率分别达到68%,97.3%,97.31%,且GH3家族的酶用量少、催化效率高。研究结果为高效酶的获得及规模化生物制备黄芩素提供了技术支撑。
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