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目的 获取有效沉默人结肠癌HT29细胞的芳香烃受体核转位蛋白基因(ARNT)的短发卡RNA(shRNA)重组慢病毒.方法 构建4组表达ARNT-shRNA的慢病毒载体和1组无效干扰慢病毒载体并测序鉴定.用合成的5组重组慢病毒转染HT29细胞,通过克隆稀释扩大培养获取5组稳定转染细胞株,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot检测沉默效率.结果 成功构建4组表达ARNT-shRNA的重组慢病毒,其中1组(LV-ARNT-RNAi-3)转染HT29细胞后能有效沉默ARNT基因,mRNA相对表达下降70% (P<0.05),蛋白水平表达下降60% (P<0.05).结论 重组慢病毒LV-ARNT-RNAi-3可以下调人结肠癌HT29细胞ARNT基因的表达。