检测大鼠肾小管上皮细胞是否表达CD131并探讨其在促红细胞生成素(EPO)抑制大鼠肾小管上皮细胞凋亡中的作用。
方法传代培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E，将NRK-52E细胞随机分为正常对照组、高糖组、高糖+EPO组、高糖+EPO+Scramble siRNA组、高糖+EPO+EPO受体(EPOR) siRNA组(EPOR siRNA干扰组)及高糖+EPO+CD131 siRNA组(CD131 siRNA干扰组)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blot、免疫荧光检测NRK-52E细胞内EPOR及CD131的表达，免疫共沉淀(co-IP)检测EPOR、CD131在NRK-52E细胞内的结合情况。TUNEL法检测NRK-52E细胞凋亡情况，RT-qPCR、Western blot检测NRK-52E细胞内Caspase-3的表达情况。
结果RT-qPCR、Western blot检测显示NRK-52E细胞表达EPOR和CD131，且高糖孵育后NRK-52E细胞内EPOR、CD131表达增高。免疫荧光检测显示EPOR和CD131在NRK-52E细胞内存在共定位表达，co-IP检测显示EPOR和CD131在NRK-52E细胞内存在相互结合。TUNEL检测显示，与正常对照组相比，高糖组NRK-52E细胞凋亡率显著增加。与高糖+EPO组相比，EPOR siRNA及CD131 siRNA干扰组NRK-52E细胞凋亡率显著增加。与正常对照组相比，高糖组NRK-52E细胞Caspase-3表达显著增高。通过siRNA干扰抑制EPOR、CD131表达后，EPO对Caspase-3表达的抑制作用减弱。
结论大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E表达EPOR和CD131，且两者在NRK-52E细胞内可形成EPOR-CD131异二聚体，介导EPO抑制NRK-52E细胞凋亡。