【摘 要】
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传统mRNA差异显示技术针对真核细胞mRNA3’端poly（A）尾设计12种两个锚定碱基的Oligo（dT）引物（第1位碱基不为A），将不同的mRNA反转录成cDNA；同时在5’端设计20种lObp随机引物，这样构成的
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院寄生虫学实验室
【基金项目】
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河南省自然科学基金项目（0311032400）
论文部分内容阅读
传统mRNA差异显示技术针对真核细胞mRNA3’端poly（A）尾设计12种两个锚定碱基的Oligo（dT）引物（第1位碱基不为A），将不同的mRNA反转录成cDNA；同时在5’端设计20种lObp随机引物，这样构成的引物对可扩增出大体涵盖一定发育阶段某种细胞类型中所表达的全部mRNA，经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，对比挑选差异表达片段。该技术具有简便、快速、RNA用量少、可同时比较多个样品、灵敏度高等优点，其主要不足是假阳性率较高。经不断优化反应条件，显著降低了假阳性的出现。目前该方法广泛应用于医学、动植物
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