MIBP1基因敲除载体的构建

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目的:构建MIBP1基因敲除载体。方法:以小鼠129胚胎干细胞基因组DNA为模板,根据GenBank注册序列,扩增小鼠MBP-2基因启动子区5’端片段(5’arm)和内含子区3’端片段(3’arm),然后分别克隆进敲除载体pKO Scrambler NTKV-1906,酶切鉴定后即得到MIBP1基因敲除载体pNTKV-3’,5’arm。用SalI对pNTKV-3’,5’arm线性化,用于胚胎干细胞电转染。结果:成功扩增并克隆到小鼠129胚胎干细胞MBP-2基因的5’arm和3,arm片段,构建了MIBP1
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