tRNA^val-CTE复合核酶真核表达载体构建

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目的构建tRNA^val—CTE复合核酶真核表达载体,为进一步研究打下基础。方法用RT—PCR法扩增CTE DNA;合成含tRNA^val启动子和HCV5-NCIK区195住的核酶以覆内切酶KpnⅠ和EcoRⅤ序列,通过退火连接到pPUR质粒的BamHⅠ和EcoRⅠ的酶切位点之间,构建质粒pPHCV—Rz;用KpnⅠ和EcoRⅤ双酶切后,将CTE cDNA定向插入表达载体pPHCV—Rz多克隆位点中,构建成重组表达质粒,并用酶切分析和序列测定进行了鉴定。结果酶切鉴定和测序证实tRNA^val启动子和HCV
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