弓形虫复合抗原基因P30-ROP2体外扩增、克隆及真核表达重组质粒的构建

来源 :中国寄生虫病防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiezhen120
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目的构建弓形虫RH株pcDNA3.1-P30-ROP2真核表达重组质粒,为进一步表达及DNA疫苗的研制作准备. 方法用PCR技术从弓形虫RH分离株的基因组DNA中扩增编码 P30基因片段和棒状体蛋白(ROP2)的基因片段,重组入pUC18克隆载体,然后将pUC18-P30-ROP2中的P30-ROP2外源基因片段经酶切、连接等反应,亚克隆入pcDNA3.1真核表达载体,再经含氨苄青霉素的LB培养基筛选、酶切及PCR鉴定. 结果从弓形虫RH株基因组中扩增出特异的P30、ROP2片段,克隆成功pUC18-P3
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