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目的 通过快速革兰氏染色法分别对SD雌性大鼠、C57BL/6J雌性小鼠进行阴道涂片染色，镜下观察细胞形态，为快速鉴别动情周期寻求简单易行的染色方法。方法 12只SD雌性大鼠和12只C57BL/6J雌性小鼠，56～62日龄，每天9:00采用阴道拭子法获得阴道涂片，干燥后进行快速革兰氏染色法，连续观察12 d,于光镜下观察细胞形态，判断其动情周期阶段。结果 快速革兰氏染色法用时较短，操作简单，观察视野色彩鲜明，背景干净，绘制完整的大、小鼠动情周期变化图。结论 快速革兰氏染色法可简单、直观的判断大、小鼠动情周期，并优化染色步骤，对染色中出现的异常情况进行逐一分析，将每张涂片染色时间缩短至1 min以内，对实验新手易于掌握，可推广应用。