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目的:该研究通过探讨不同的刺激培养条件和检测方法对Th17细胞频率的影响,建立和优化流式细胞术检测人外周血Th17细胞频率实验方案。方法采用不同浓度的佛波酯(PMA,终浓度50、100、150、200、250、300ng/mL)与离子霉素(Ionomycin)1μg/mL对健康人外周血进行刺激培养,分别于刺激后4、6、8、10和12h用流式细胞术分析Th17细胞频率,并检测PMA刺激前后细胞表面与胞膜内CD4平均荧光强度(MFI)和CD4阳性T细胞比例。结果 PMA 150ng/m+Ionomycin 1