猪表皮生长因子在大肠杆菌中的表达

来源 :华南农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zbl666
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采用RT-PCR方法从猪肾脏皮质组织中扩增出pEGF基因,将其连接到克隆载体pMD18-T上,经测序鉴定正确后,再克隆到原核表达载体pET-41a(+)上,构建重组表达质粒pET-EGF.用重组质粒转化Ecoli BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导表达后利用SDS-PAGE电泳和Western-blotting对GST—EGF融合蛋白进行分析,结果表明37℃诱导表达的融合蛋白含量较高,占菌体总蛋白的20.2%;30℃诱导表达的可溶性融合蛋白含量较高,占菌体总蛋白的7.7%.
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