犬心房肌细胞分离的方法学探讨

来源 :中国心脏起搏与心电生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:st704250036
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目的建立稳定的适于膜片钳实验研究的犬心房肌细胞分离方法。方法取健康成年犬心脏12个,采用Langendorff灌流,行回旋支插管,正常台式液灌流10s,使心脏自主收缩排除残留余血。持续高钾液灌流,同时结扎其他血管及分支,剪去其余心脏组织,待左房及左心耳充盈,无钙台氏液灌流5min,125U/ml胶原酶Ⅱ200ml反复灌流消化约30~45min,后用无钙台氏液冲洗心脏5min,剪下心房肌组织,KB液中室温下剪碎,吹打,孵育5min后,用200目筛网过滤,逐步复钙法复钙后,室温静置1h,应用于膜片钳记录。结果
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