【摘 要】
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采用PCR技术从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码MIC3的基因,克隆入pMD18-T载体,转化至E.coli DH 5α感受态细胞,经抗性平板筛选、小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定后,
【机 构】
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华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,长江大学动物科学学院,华中农业大学动物医学院
【基金项目】
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教育部高等学校博士点科研基金项目（20040504016）,教育部重点科研项目（105120）
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采用PCR技术从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码MIC3的基因,克隆入pMD18-T载体,转化至E.coli DH 5α感受态细胞,经抗性平板筛选、小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定后,亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1.然后筛选含有目的基因的重组质粒,并转染IBRS-2细胞,在G418压力下进行筛选,利用SDSPAGE、Western blot和ELISA检测表达情况.结果显示,扩增的MIC3基因与GenBank上相应基因序列（AJ132530）的一致性达99.9%,构建的真核表达质粒p
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