【摘 要】
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目的采用酵母双杂交体系寻找与脆性X智力低下蛋白(Fragile X men-tal retadation protein,FMRP)相互作用的蛋白,探讨FMRP的生物医学功能.方法以编码FMRPPro327-Thr518肽段的c
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室，北京 100005;IGBMC,CNRS-INSERM-ULP,67404 Illkirch,France
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目的采用酵母双杂交体系寻找与脆性X智力低下蛋白(Fragile X men-tal retadation protein,FMRP)相互作用的蛋白,探讨FMRP的生物医学功能.方法以编码FMRPPro327-Thr518肽段的cDNA序列与pBTM116质粒DNA结合结构域重组作为"钓饵”,从小鼠胚胎cDNA文库中筛选与之相互作用蛋白的cDNA.结果筛选出13个与FMRPPro327-Thr518肽段特异性地相互作用的克隆,其中12个为小鼠泛素转运酶9(UBC9),1个是在GenBank中无高同源序列的未知cDNA序列.结论小鼠UBC9与人UBC9的氨基酸序列完全相同,且FMRP与UBC9蛋白表达的时空特征相似,因此认为人UBC9是与FMRP相互作用的蛋白,其相互作用的生物学意义有待进一步研究.本工作表明酵母双杂交体系是研究蛋白质相互作用的有效方法.
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